ça dépend pas mal en fait de ce que tu veux séparer.
Comme le dis petit pimoose, tu dois pouvoir séparer les graves des aigues, mais tu peux difficilement, sur un produit fini type MP3, séparéer réellement les instruments.
Le problème, c'est que même si chaque instrument est enregistré au départ sur des pistes différentes, le morceau fini ne comporte plus qu'une piste unique.
En la reséparent, tu pourra jamais obptenir les pistes originales. Au mieux des moitiés de pistes.
En séparant les différentes fréquences, tu va te retrouver avec des lignes qui sont des petits bouts de tous les instruments, et non la ligne d'un instrument unique.
l'idéal, c'est de pouvoir travailler sur ce qu'on appèle le "master" du morceau, c.a.d l'enregistrement mustipiste original... malheureusement, si t'es pas le créateur du morceau, t'aura jamais accès à ce truc la